Secuenciación Sanger

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En este servicio se realiza la secuenciación de fragmentos de ADN por Sanger con tecnología SeqStudio Genetic Analyzer de Thermo Fisher Scientific.

La longitud máxima de secuenciación es de 250 a 800 bp por sentido de un fragmento de PCR. Este servicio de secuenciación requiere que el cliente envíe los primers específicos que amplifican la región de interés a secuenciar.

Requerimentos de de muestra:

• Productos de PCR:
  la cantidad mínima por reacción de secuenciación a recibir son 150 ng en un volumen igual a 10 uL, es decir, la concentración aceptable mínima es de 15 ng/uL.
• Plásmidos:
  la cantidad mínima son 1000 ng, en un volumen igual a 10 uL, es decir la concentración debe ser al menos de 100 ng/uL.
• Adicional a las muestras, deberá enviar los primers que se usarán para secuenciar los fragmentos de interés. Cada reacción de secuenciación hace uso de un primer.

En el caso de querer secuenciar un fragmento flanqueado por dos primers, deberá enviar cada primer por separado y suficiente ADN para cada una de las dos reacciones.

Por cada 10 muestras que serán secuenciadas con un primer determinado deberá enviar 10 uL de dicho primer a una concentración 10 uM.